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H&E GST標(biāo)簽蛋白純化親和介質(zhì)
GST(谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶)能特異的與谷胱甘肽結(jié)合,表現(xiàn)為酶和底物的作用原理,利用這個(gè)原理,將GST做成標(biāo)簽表達(dá)出融合蛋白,與谷胱甘肽配基的親和介質(zhì)特異性結(jié)合,從而純化出目標(biāo)蛋白。GST融合蛋白純化的特點(diǎn)有:純度高、純化條件溫和、保持蛋白活性、促進(jìn)蛋白可溶性表達(dá)等。
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GST標(biāo)簽蛋白純化親和介質(zhì)列表

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

功能載量

/1ml介質(zhì)

粒徑范圍μm

耐受壓力

MPa

最大流速cm/h

pH

穩(wěn)定性

應(yīng)用

HZ1008-2

GST Focurose 4FF

15mg

(GST標(biāo)簽蛋白)

45-165

0.3

450

3-12

純化GST標(biāo)簽蛋白

備注

GST標(biāo)簽蛋白純化親和介質(zhì)除4FF基質(zhì),也可以定制其它基質(zhì),如4B6FF等。

GST標(biāo)簽蛋白純化親和介質(zhì)可以提供25ml100ml300ml500ml1L5L10L等各種包裝規(guī)格。


GST標(biāo)簽蛋白純化親和介質(zhì)使用注意事項(xiàng):

★ GST親和層析是利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過(guò)硫鍵共價(jià)親和結(jié)合,結(jié)合過(guò)程較慢,上樣時(shí)流速不宜過(guò)快,且緩沖液pH須控制在6.5到8.0之間;緩沖液添加1-10mM的DTT,可有效促進(jìn)蛋白的溶解;添加100-300mM的NaCl可以減少蛋白之間及蛋白和核酸之間的結(jié)合。

★ 洗脫緩沖液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,也可在洗脫緩沖液中加入1-5 mM的DTT;洗脫緩沖液中加入1%-2%的Triton X-100可以顯著提高某些GST標(biāo)簽蛋白的洗脫,降低非特異性吸附。

★ 在宿主細(xì)胞表達(dá)GST標(biāo)簽蛋白的過(guò)程中,宿主細(xì)胞代謝的酶使GST-tag和目的蛋白分開(kāi),此時(shí)可嘗試換宿主細(xì)胞或者優(yōu)化序列。

★ 純化過(guò)程中要防止蛋白酶降解蛋白,必要時(shí)可以嘗試添加一些蛋白酶抑制劑。
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